目前,可用于飼料添加劑領(lǐng)域工業(yè)化生產(chǎn)的菌種很多,我國(guó)農(nóng)業(yè)部(2008)公布的飼用微生物添加劑有16種。其中芽孢桿菌、酵母菌和乳酸菌是應(yīng)用最多的微生物添加劑菌種。芽孢桿菌由于穩(wěn)定性好、抗逆性強(qiáng)、復(fù)活率高,通過與病原菌競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),抑制病原菌;提高機(jī)體的免疫機(jī)能,并提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等作用,調(diào)節(jié)消化道健康,增強(qiáng)動(dòng)物體的免疫功能,達(dá)到促進(jìn)目標(biāo)動(dòng)物的生長(zhǎng)、提高飼料的轉(zhuǎn)化率的目的。本文將簡(jiǎn)單介紹芽孢桿菌的生長(zhǎng)繁殖及其營(yíng)養(yǎng)和免疫的特點(diǎn),以及作用機(jī)制的研究進(jìn)展。
一、芽孢形成、結(jié)構(gòu)和種類
某些細(xì)菌在生長(zhǎng)后期能夠形成一種特有的休眠狀態(tài)的細(xì)胞,稱為內(nèi)生孢子,亦稱芽孢。芽孢桿菌的芽孢直徑一般小于菌體直徑,圓形、橢圓形,為好氧細(xì)菌。芽孢的形成是一個(gè)極其復(fù)雜的過程,包括形態(tài)結(jié)構(gòu)、化學(xué)成分等多方面的變化。光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡觀察研究的結(jié)果,表明芽孢的形成在結(jié)構(gòu)上主要經(jīng)歷以下幾個(gè)階段:核物質(zhì)融合成軸絲狀(桿狀);在細(xì)胞中央或一端,細(xì)胞膜內(nèi)陷形成隔膜包圍核物質(zhì),產(chǎn)生一個(gè)小細(xì)胞;小細(xì)胞被原來的細(xì)胞膜包圍,生成前孢子。前孢子實(shí)質(zhì)上是一個(gè)被兩層同心膜包圍著的原生質(zhì)體。在光學(xué)顯微鏡下觀察未染色的活細(xì)菌,可以看到前孢子是一個(gè)清亮的、與菌體其他部分明顯不同的區(qū)域;前孢子再被多層膜包圍,如皮層、孢子衣等,最后成為成熟的芽孢,由于細(xì)胞壁的潰溶而釋放出來。
芽孢形成過程中在化學(xué)成分方面也發(fā)生很大變化。生芽孢的細(xì)胞大量吸收鈣離子并大量合成營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞中沒有的吡啶二羧酸。在成熟的芽孢中,芽孢原生質(zhì)體含有極高的吡啶二羧酸鈣,在新合成的、具有特殊化學(xué)構(gòu)造的外層(皮層和孢子衣,有時(shí)還有芽孢外壁)中也有這種物質(zhì)。芽孢的壁含有一種特殊的肽聚糖,所有芽孢基本上都一樣,但與營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞壁肽聚糖卻不一樣。同時(shí),芽孢中還含有一些特殊的蛋白質(zhì)。
二、芽孢的特性
2.1芽孢桿菌的抗逆性
由于芽孢在結(jié)構(gòu)和化學(xué)成分上均有別于營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞,所以芽孢也就具有了許多不同于營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞的特性。芽孢最主要的特點(diǎn)就是抗性強(qiáng),對(duì)高溫、紫外線、干燥、電離輻射和很多有毒的化學(xué)物質(zhì)都有很強(qiáng)的抗性。同時(shí),芽孢還有很強(qiáng)的折光性。在顯微鏡下觀察染色的芽孢細(xì)菌涂片時(shí),可以很容易地將芽孢與營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞區(qū)別開,因?yàn)闋I(yíng)養(yǎng)細(xì)胞染上了顏色,而芽孢因抗染料且折光性強(qiáng),表現(xiàn)出透明而無色的外觀。研究表明芽孢抗逆性的機(jī)制主要由于其含水量低(40%),含有耐熱的小分子酶類、富含大量特殊的吡啶二羧酸鈣和帶有二硫鍵的蛋白質(zhì),以及具有多層次厚而致密的芽孢壁等原因,使得芽孢具有了抗逆性。自由存在的芽孢沒有明顯的代謝作用,只保持潛在的萌發(fā)力,稱為隱藏的生命。一旦環(huán)境條件合適,芽孢便可以萌發(fā)成營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞。
在孢子狀態(tài)下穩(wěn)定性好,能耐氧化;耐擠壓;耐高溫,能長(zhǎng)期耐高溫,如(如金)枯草芽孢桿菌一般在95℃下5分鐘89%能保持存活;耐酸堿,在酸性胃環(huán)境中能保持活性,可以耐唾液和膽汁的攻擊,加工成飼料后95%可在動(dòng)物體內(nèi)的可以萌發(fā)成營(yíng)養(yǎng)體。